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A1 Tre:BACE2+FRET Substrate 2 0 Dox | A2 Tre:miRG1,Hef1a:BACE1 (0 Dox) +FRET Substrate 1 | A3 Tre:miRG1,Hef1a:BACE1 (1000 Dox) +FRET Substrate 1 | A4 Tre:BACE2+FRET Substrate 2 1000 Dox | A5 Assay Buffer 1 + FRET Substrate 1 | A6 Assay Buffer 2 + FRET Substrate 2 | A7 Purified BACE1 + FRET Substrate 1 |
B1 5 uM Reference Standard+ FRET 1 | B2 2.5 uM Reference Standard+ FRET 1 | B3 1.25 uM Reference Standard+ FRET 1 | B4 0.63 uM Reference Standard+ FRET 1 | B5 0.32 uM Reference Standard+ FRET 1 | B6 0.16 uM Reference Standard+ FRET 1 | |
C1 5 uM Reference Standard+ FRET 2 | C2 2.5 uM Reference Standard+ FRET 2 | C3 1.25 uM Reference Standard+ FRET 2 | C4 0.63 uM Reference Standard+ FRET 2 | C5 0.32 uM Reference Standard+ FRET 2 | C6 0.16 uM Reference Standard+ FRET 2 |
Assay Buffer 2 + FRET Substrate 2
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purified BACE1 (1F) : Assay buffer (1D) 1:250
50 uL total: 0.2 1 uL 1F : 49.8 249 uL
Prepare substrates:
for BACE2 - component 2A:2C in 1:100 ratio
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